4.4.3.1  2 mol·L-1KCl浸提—蒸餾法

4.4.3.1.1方法原理  用2mol·L-1KCl浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來(lái)。取一份浸出液在半微量定氮蒸餾器中加MgO（MgO是弱堿，有防止浸出液中酰銨有機(jī)氮水解的可能）蒸餾。蒸出的氨以H3BO3吸收，用標(biāo)準(zhǔn)酸溶液滴定，計(jì)算土壤中的NH4+—N含量。

4.4.3.1.2主要儀器  振蕩器、半微量定氮蒸餾器、半微量滴定管（5mL）。

4.4.3.1.3試劑

（1）20g·L -1硼酸—指示劑。20gH3BO3（化學(xué)純）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基紅—溴甲酚綠混合指示劑5mL并用稀酸或稀堿調(diào)節(jié)至微紫紅色，此時(shí)該溶液的pH為4.8。指示劑用前與硼酸混合，此試劑宜現(xiàn)配，不宜久放。

（2）0.005 mol·L-11/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)液。量取H2SO4（化學(xué)純）2.83mL，加蒸餾水稀釋至5000mL，然后用標(biāo)準(zhǔn)堿或硼酸標(biāo)定之，此為0.0200 mol·L-1 (1/2H2SO4)標(biāo)準(zhǔn)溶液，再將此標(biāo)準(zhǔn)液準(zhǔn)確地稀釋4倍，即得0.005mol·L-11/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)液（注1）。

（3）2 mol·L-1KCl溶液  稱KCl（化學(xué)純）14901g溶解于1L水中。

（4）120g·L–1MgO懸濁液  MgO12g經(jīng)500～600℃灼燒2h，冷卻，放入100mL水中搖勻。

4.4.3.1.4操作步驟

取新鮮土樣10.0g（注2），放入100mL三角瓶中，加入2mol·L-1KCl 溶液50.0mL。用橡皮塞塞緊，振蕩30min，立即過(guò)濾于50mL三角瓶中（如果土壤NH4+—N含量低，可將液土比改為2.5:1）。

吸取濾液25.0mL（含NH4+—N25µg以上）放入半微量定氮蒸餾器中，用少量水沖洗，先把盛有20g·L –1硼酸溶液5mL的三角瓶放在冷凝管下，然后再加120g·L –1 MgO懸濁液10mL于蒸餾室蒸餾，待蒸出液達(dá)30～40mL時(shí)（約10min）停止蒸餾，用少量水沖洗冷凝管，取下三角瓶，用0.005mol·L-11/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)液滴至紫紅色為終點(diǎn)，同時(shí)做試驗(yàn)。

4.4.3.1.5結(jié)果計(jì)算

土壤中銨態(tài)氮NH4+—（N）含量（mg·kg-1）= 

式中：c——0.005mol·L-11/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度；

     V——樣品滴定硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(mL)；

     V0——滴定硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(mL)；

    14.0——氮的原子摩爾質(zhì)量（g·mol-1）；

    ts——分取倍數(shù)；

    103——“換算系數(shù)”（包括mL換算為L(zhǎng)，10-3；g換算為mg，103；換算為kg，103）；

    m——烘干樣品質(zhì)量（g）。

4.4.3.2   2mol·L-1KCl浸提—靛酚藍(lán)比色法

4.4.3.2.1方法原理  2mol·L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來(lái)。土壤浸提液中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮0.05～0.5mol·L-1的范圍內(nèi)，吸光度與銨態(tài)氮含量成正比，可用比色法測(cè)定。

4.4.3.2.2試劑

（1）2mol·L-1KCl溶液  稱取149.1g氯化jia（KCl，化學(xué)純）溶于水中，稀釋至1L。

（2）苯酚溶液  稱取苯酚（C6H5OH，化學(xué)純）10g和硝基鐵qing化鈉[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀釋至1L。此試劑不穩(wěn)定，須貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸鈉堿性溶液  稱取氫氧化鈉（化學(xué)純）10g、磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O, 化學(xué)純）7.06g、磷酸鈉（Na3PO4·12H2O, 化學(xué)純）31.8g和 52.5g·L-1次氯酸鈉(NaOCl，化學(xué)純，即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中，稀釋至1L，貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽劑  將400g·L-1的酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O, 化學(xué)純）與100g·L-1的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100mL混合液中加入10 mol·L-1氫氧化鈉0.5mL。

（5）2.5µg·mL –1銨態(tài)氮（NH4+—N）標(biāo)準(zhǔn)溶液  稱取干燥的硫酸銨[(NH4)2SO4，分析純]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制備成含銨態(tài)氮（N）100µg·mL –1的貯存溶液；使用前將其加水稀釋40倍，即配制成含銨態(tài)氮（N）2.5µg·mL –1的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

4.4.3.2.3儀器與設(shè)備  往復(fù)式振蕩機(jī)、分光光度計(jì)。

4.4.3.2.4分析步驟

（1）浸提  稱取相當(dāng)于20.00g干土的新鮮土樣（若是風(fēng)干土，過(guò)10號(hào)篩）準(zhǔn)確到0.01g，置于200mL三角瓶中，加入氯化jia溶液100mL，塞緊塞子，在振蕩機(jī)上振蕩1h。取出靜置，待土壤—氯化jia懸濁液澄清后，吸取一定量上層清液進(jìn)行分析。如果不能在24h內(nèi)進(jìn)行，用濾紙過(guò)濾懸濁液，將濾液儲(chǔ)存在冰箱中備用。

（2）比色  吸取土壤浸出液2mL～10mL(含NH4+—N2µg～25µg)放入50mL容量瓶中，用氯化jia溶液補(bǔ)充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL，搖勻。在20℃左右的室溫下放置1h后（注1），加掩蔽劑1mL以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm比色槽在625nm波長(zhǎng)處（或紅色濾光片）進(jìn)行比色，讀取吸光度。

（3）工作曲線 分別吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL 

NH4+—N標(biāo)準(zhǔn)液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化na溶液，同（2）步驟進(jìn)行比色測(cè)定。

4.4.3.2.5結(jié)果計(jì)算

土壤中NH4+—（N）含量（mg·kg-1）= 

式中：ρ——顯色液銨態(tài)氮的質(zhì)量濃度(µg·mL –1)；

     V——顯色液的體積(mL)；m

     ts——分取倍數(shù)；

     m——樣品質(zhì)量（g）。

注釋

注1. 顯色后在20℃左右放置1h,再加入掩蔽劑.過(guò)早加入會(huì)使顯色反應(yīng)很慢,藍(lán)色偏弱;加入過(guò)晚,則生成的氫氧化物沉淀可能老化而不易溶解.